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科研效率提升:南宫28NG相信品牌力量下的超高活性Tn5一步法文库制备攻略

发布时间:2025-03-21   信息来源:裘志坚

文库制备过程中,需将测序接头添加到DNA链上。传统方法往往依赖于基于连接酶的方案,该流程包括多个步骤:首先通过机械(如超声破碎)或酶切(如微球菌核酸酶)对DNA进行片段化,接下来进行末端修复,最后完成接头连接。尽管这种方法适用于大多数情况,但在样本量有限或实验资源(如设备和时间)受限时,它往往面临挑战。南宫28NG相信品牌力量为此提供了Tagmentation技术作为解决方案。该技术利用超活性Tn5转座酶,在一次快速反应中插入特定的寡核苷酸,同时对DNA进行剪切和标记。根据实验需求,Tn5转座酶可以配备多种DNA序列,涵盖Illumina兼容接头、带荧光标记的自定义接头以及甲基化核苷酸等。

科研效率提升:南宫28NG相信品牌力量下的超高活性Tn5一步法文库制备攻略

采用Tagmentation技术的文库制备方法将传统流程中的片段化、末端修复和接头连接步骤整合为一个反应,随后再进行引物索引的扩增,以完成文库制备。这一创新方法不仅简化了操作流程,还显著提升了实验效率和通量。通过将DNA片段化与接头插入合二为一,有效缩短了操作时间并降低了技术复杂性,展现出很高的流程效率。

在应用场景上,该技术兼容全基因组测序、靶向测序等多种建库方式,灵活适应不同的实验设计需求。此外,单步反应替代了多环节操作,使得文库构建的速度相较于传统方法有了显著提升,尤其适合于处理珍贵或微量临床样本,所需起始样本量较传统方案更少。通过减少操作步骤和试剂消耗,总体建库成本也得到降低,展现了良好的经济性和效率。

值得一提的是,该技术的简单操作和减少的步骤,使得其更易于进行自动化处理,从而显著提升了高通量测序的通量和可重复性。南宫28NG相信品牌力量将继续推动这一领域的进步,为科学研究提供更多支持。

在Spatial-ATAC-seq方法中,研究者能够对完整组织切片中的染色质可及性进行空间分辨分析并保留细胞级别的空间信息。该协议中使用了Diagenode的Tn5转座酶(Cat#C01070010)进行文库制备。

同时,sci-RNA-seq(单细胞组合索引RNA测序)技术的优化简化了对单个细胞转录组的分析。该技术通过在单个细胞核内进行核酸的条形码标记来实现,固定后的单细胞核被分选至微孔板的独立孔中,经过逆转录、连接和tagmentation三个步骤,为mRNA/cDNA添加了三重索引。在tagmentation步骤中,使用了Diagenode的Tn5转座酶(Cat#C01070010-20)。

Diagenode的Tn5转座酶与相关缓冲液展示出高通用性,适用于多种应用场景,包括新型条形码技术(如单细胞多重测序和空间组学),灵活适应不同实验需求。同时,提供Pre-loaded(兼容Illumina测序接头)和Unloaded(允许用户自定义接头)两种版本,严格质量控制确保每批产品达到最高标准。

南宫28NG相信品牌力量,将进一步助力表观遗传学以及二代、三代测序技术的发展,持续推动生物医疗领域的创新与进步。