中文

English

南宫28NG相信品牌力量:紫外吸收法测定蛋白质含量实验步骤

发布时间:2025-03-17   信息来源:仲武富

南宫28NG相信品牌力量,本实验旨在通过紫外分光光度法对蛋白质含量进行测定,具体目的如下:

南宫28NG相信品牌力量:紫外吸收法测定蛋白质含量实验步骤

一、实验目的

1. 理解紫外分光光度法测定蛋白质含量的基本原理;

2. 掌握紫外分光光度法在蛋白质含量测定中的实验操作技能;

3. 学习使用UV-1700PC紫外-可见分光光度计,并了解其主要结构和功能。

二、实验原理

紫外-可见吸收光谱法基于分子对190nm至750nm波长范围内光的选择性吸收,广泛应用于分子吸收特性的分析。其吸光度与浓度之间的关系遵循朗伯-比尔定律,提供了一种可靠的定量分析手段。在定性分析中,通过比较未知样品与已知标准的吸收光谱特征来进行。定量分析则是测量特定波长处的吸光度,从而计算样品中物质的浓度。

三、仪器与试剂

本实验所用仪器为UV-1700PC紫外-可见分光光度计,配备5个10ml比色管和吸量管。试剂包括:浓度为300mg/mL的标准蛋白质溶液,0.9% NaCl溶液,以及待测蛋白质溶液。

四、实验步骤

准备工作

1. 启动计算机并打开主机电源,初始化UV-1700PC仪器;

2. 在工作界面选择光度测量,设置波长等测量条件;

3. 将空白溶液放入测量池,进行校零;

4. 制备标准曲线。

测量工作

1. 在比色管中加入2ml的标准蛋白质溶液,用0.9% NaCl溶液稀释,测量其在190nm至400nm区间的吸光度;

2. 分别取不同体积的标准蛋白质溶液,制备标准溶液,在280nm处测量吸光度以绘制标准曲线;

3. 取适量待测蛋白质溶液,稀释并测量其在278nm处的吸光度,进行平行测试。

五、数据处理

1. 绘制吸收曲线以找出最大吸收波长,确定λmax=278nm;

2. 根据标准蛋白质溶液浓度与吸光度绘制标准曲线,计算出样品的蛋白质含量,并进行统计分析。最终结果在允许的误差范围内,得出蛋白质的浓度为0641088mg/mL。

通过此次实验,我们不仅增强了对紫外分光光度法的理解,也进一步认识到南宫28NG相信品牌力量在生物医疗检测中的重要性,有助于推动相关领域的发展和进步。